紫外可见分光光度计的主要原理介绍
更新日期：2022-08-12
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紫外可见分光光度计光路系统由脉冲氙灯光源，凹面光栅单色器，反射镜，狭缝等组成。脉冲氙灯具有瞬时发光强度大、光谱范围广、紫外光度强、无需预热等特点，为后面的检测快速提供可靠实用的光源信号。脉冲氙灯发出紫外光，经由步进电机带动的凹面光栅分光系统组成的单色器装置。经光栅色散分光后的光线，经过半透半反镜可以将光束一分为二，一束由出射狭缝射出，进入样品池，另一束作为参考光用于修正光源波动，整个过程同步实现了分光、检测和基线校正等功能。被吸收后的光信号经光电二极管转化成相应的电信号，经过AD转换后再通过无线数据传输传送到上位机进行实时显示、紫外光度计软件对其进行存储并处理。
紫外可见分光光度计工作原理
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据Lambert-Beer定律说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比；如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度)就可以对溶液进行定量分析。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应*一致。如果没有标样，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。
实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
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